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分光光度計法測亞硝酸鹽
發布時間:2019-03-15 點擊次數:985次

分光光度計法測亞硝酸鹽

亞硝酸鹽在亞硫酸鹽氧化酶存在時被氧化成硫酸鹽,同時釋放出過氧化氫。在NADH過氧化酶的作用下過氧化氫被降解,NADH轉化成NAD+,NADH向NAD+的轉化能夠以分光光度計真人百家家乐法在340nm處檢測,轉化量與亞硫酸鹽的濃度相關。

不同樣品中對亞硝酸鹽的檢測

準備樣品溶液  常規:除去含量大于100mg/kg或100mg/L的高濃度抗壞血酸(如水果汁)如果被測樣品中的亞硫酸鹽含量高于0.3g/L時,稀釋樣品,或取更小體積的樣品用于檢測。
 液態樣品
1.白葡萄酒、白蘭地、啤酒:白葡萄酒和白蘭地可以直接分析,啤酒在分析之前必須要將二氧化碳除掉,同時可能有必要將啤酒脫色。脫色方法:在50mL的玻璃燒杯中往10mL過濾過的啤酒中加入不超過0.7g的白土(火山灰形成的一種黏土),用磁力攪拌器混合2min,然后過濾,將濾液收集到另外一個50mL的玻璃燒杯中。
取100~200ul的葡萄酒或500ul的白蘭地或啤酒用于酶法檢測分析。
2.紅葡萄酒  將置于燒杯中的25mL紅葡萄酒的PH用氫氧化鈉溶液調到7.5~8.0,將溶液轉移到50mL的容量瓶中,然后加水到刻度混勻,通常有必要使紅葡萄酒脫色,其方法在水果汁處理方法中有介紹。
3.水果汁:將渾濁水果汁在2000g的條件下離心,加5mL果汁到燒杯中,并用氫氧化鈉溶液將PH調節到5~6,加大約40個單位的抗壞血酸氧化酶溶液到果汁中,靜置10min以除去抗壞血酸,或者用涂有抗壞血酸氧化酶的刮刀攪動果汁3min以除去抗壞血酸,然后再用氫氧化鈉溶液將PH調節到7.5到8.0.如果是有顏色的果汁,首先加大約0.25g的交聯聚乙烯吡咯烷酮,攪拌1Min,將混合物轉移至10mL容量瓶中,加水至刻度,將溶液過濾,取200ul用于酶法分析。
3.固態食品   將樣品充分粉碎均質,并在60℃下用水提取5min,提取過程中不時振蕩,在分析之前將樣品冷卻至室溫。根據亞硫酸鹽含量的不同取不同體積的樣品,如土豆餅檢測時,取5.0g均質后的樣品到50mL容量瓶中,加40mL水,塞上塞子,在60℃水浴下提取5min,提取的過程中間或振蕩,可以靜置至少15Min,冷卻至室溫,也可以放到20℃水浴中冷卻,加水至刻度,如有必要將溶液離心,備用。
一些其他食品取樣量建議如下:
1.干果:1.0g樣品/50mL水
2.果醬:5.0g樣品/50mL水
3.調味品:0.1g樣品/50ml水
真人百家家乐4.干土豆制品:2.0g樣品/50ml水

真人百家家乐按上述方法操作,一般在20~25℃取100ul樣品到石英比色皿中,如果樣品體積不到100ul,需加水調節以使水和樣品的最終體積為2.00mL。檢測過程中如果反應沒有停止,保持每隔2min讀一次吸光度,直到最后吸光度值變化恒定。如果吸光值持續下降,那就倒推樣品在添加亞硫酸鹽氧化酶懸浮液時的吸光值,從而計算A2用量。


 

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